选用8周龄的雄性SD大鼠作为实验对象,确保动物健康状态良好。
麻醉处理:** 对选定的大鼠采用适当的麻醉剂进行麻醉,确保其在后续操作中无痛感。
颈部处理:** 麻醒后,去除大鼠颈部区域的毛发,使用固定架将其头部固定于立体定位器上,并进行严格的皮肤消毒,准备手术区域。
切开与暴露:** 在颈部正中线位置做一小切口,谨慎钝性分离肌肉组织,暴露寰枕区的硬脑膜。
脑脊液置换:** 使用微注射器缓慢穿透硬膜直到感受到阻力消失,然后注入0.02毫升无菌生理盐水悬浮液,以替代脑脊液,此过程控制在6微升/秒,注射完毕后停留10分钟以确保液体均匀分布。
闭合伤口:** 操作完毕后,用医用密封剂封闭穿刺穿孔,缝合切口,并进行必要的术后抗感染管理。
监测:** 术后每日记录大鼠体重变化,密切监测其神经功能状态,评估手术影响。
确认模型:** 术后3周,采用MRI扫描验证模型构建成功,确认脑积水情况,随后选取大鼠进行组织收集。
组织固定与染色:** 收集得的脑组织用4%多聚甲醛固定,进行HE染色,通过光学显微镜观察,模型大鼠的脑室是否显著扩大,作为模型成功的标志。
以上步骤概括了构建脑积水大鼠模型的详细流程,从动物准备到术后验证,旨在为神经系统疾病研究提供一个可靠的动物模型平台。